摘要:目的探讨不同缺血预适应(IPC)模式对大鼠骨骼肌缺血再灌注(IR)损伤的影响。方法选取40只雄性SD大鼠, 采用动脉夹夹闭一侧股动脉的方法构建大鼠骨骼肌IR损伤模型。IPC模式采用夹闭右侧股动脉10 min后松开动脉夹再灌注10 min, 重复3次进行预适应。按随机数字表法将大鼠分为常规IR组、IPC即刻组、IPC24 h组、IPC48 h组和假手术组, 每组8只。常规IR组夹闭右股动脉3 h后松开动脉夹再灌注3 h;IPC即刻组为预适应后即刻行常规IR组相同处理;IPC24 h组为预适应后缝合皮肤, 放回笼中喂养24 h后行常规IR组相同处理;IPC48 h组为预适应后缝合皮肤, 放回笼中喂养48 h后行常规IR组相同处理;假手术组钝性分离右股动脉但不夹闭。在再灌注终点, 收集胫前肌组织、腓肠肌组织和血清;计算胫前肌组织湿重/干重比值(W/D), 评估组织水肿情况;HE染色后观察腓肠肌组织病理学变化情况并对腓肠肌组织损伤程度进行评分;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测腓肠肌组织中低氧感受器(EGLN1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况。结果不同模式IPC后, 组织水肿程度均较常规IR组减轻(P均<0.01), 常规IR组、IPC即刻组、IPC24 h组、IPC48 h组W/D分别为6.05±0.19、5.70±0.12、5.25±0.13、5.50±0.08, 高于假手术组的3.80±0.08(P均<0.01);与IPC即刻组、IPC48 h组比较, IPC24 h组水肿程度最轻(P<0.05或0.01)。假手术组肌纤维排列整齐, 结构清晰, 余各组肌纤维均出现不同程度损伤和炎性浸润。IPC即刻组、IPC24 h组、IPC48 h组的组织损伤程度评分总分分别为(8.15±0.15)分、(6.15±0.38)分、(6.90±0.19)分, 低于常规IR组的(9.60±0.50)分, 高于假手术组的(0.16±0.16)分(P均<0.01);与IPC即刻组比较, IPC24 h组、IPC48 h组组织损伤程度评分总分降低(P<0.05或0.01), 但IPC24 h组与IPC48 h组组织损伤程度评分总分差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法检测显示, 不同模式IPC后, 血清TNF-α、IL-1β、MDA水平较假手术组升高(P均<0.01), 从高到低依次为常规IR组、IPC即刻组、IPC48 h组、IPC24 h组、假手术组;与IPC即刻组、IPC48 h组比较, IPC24 h组IL-1β、TNF-α、MDA水平降低(P均<0.05)。qRT-PCR检测显示, EGLN1 mRNA表达由高到低依次为常规IR组、IPC48 h组、假手术组、IPC即刻组、IPC24 h组;与常规IR组、IPC即刻组、IPC48 h组比较, IPC24 h组EGLN1 mRNA表达下降(P均<0.01)。不同模式IPC后, HIF-1α mRNA表达较假手术组增加(P均<0.01), 由高到低依次为IPC24 h组、IPC即刻组、IPC48 h组、常规IR组、假手术组;与常规IR组、IPC即刻组、IPC48 h组比较, IPC24 h组HIF-1α mRNA表达升高(P<0.05或0.01), IPC即刻组与IPC48 h组差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同缺血预适应模式能够通过减轻组织水肿、炎性症状和氧化应激反应等, 减轻大鼠骨骼肌IR损伤, 其中IPC后再灌注24 h模式减轻IR损伤的效果相对最佳;EGLN1、HIF-1α可能参与IPC减轻大鼠骨骼肌IR损伤的过程。
关键词:缺血预处理;缺血再灌注;肌, 骨骼;炎症;