摘要:背景与目的:缺血性脑卒中是最常见的卒中类型,是全球范围内致死和致残的主要原因之一。重组组织纤溶酶原激活剂(Recombinant tissue plasminogen activator,rt PA)是目前应用最广泛的AIS溶栓治疗药物,但仍有超过50%的患者在接受rt PA静脉溶栓后出现预后不良。如何提高静脉溶栓的疗效是当前临床治疗面临的一个关键问题。远隔缺血处理(Remote ischemic conditioning,RIC)是一种有效的神经保护措施,通过对肢体短暂、间断性的缺血处理,提高远隔器官对缺血的耐受性。RIC发挥神经保护作用的机制尚不明确,既往研究认为可能与炎症及免疫调节相关。本研究应用MCAO大鼠rt PA溶栓模型,探究RIC能否在脑梗死静脉溶栓治疗过程中起到神经保护作用,并进一步探究其相关作用机制。方法:本实验将92只SD雄性大鼠随机分为4组:Sham、MCAO+rt PA、MCAO+rt PA+早期RIC、MCAO+rt PA+晚期RIC。采用栓线法建立大鼠MCAO模型,栓塞120min后进行再灌注,之后立即应用rt PA尾静脉泵入进行静脉溶栓。早期RIC于梗死后40min内进行RIC处理,晚期RIC于再灌注前40min内进行RIC处理。本研究采用Zea-Longa神经功能评分量表进行行为学评价,TTC染色法检测各组梗死面积,Evan’s blue法、血红蛋白含量检测法分别评估溶栓后血脑屏障功能损伤以及出血转化情况,Western Blot法检测大脑皮层内caspase-1和IL-1β两种炎症蛋白表达水平,HE染色观察神经元损伤情况。结果:1、安全性方面:MCAO大鼠再灌注24h后,MCAO+rt PA+早期RIC和MCAO+rt PA+晚期RIC组大鼠的Evan’s blue含量与血红蛋白含量与MCAO+rt PA组相比有降低趋势(0.059 vs.0.061 vs.0.062 ug/g,0.226 vs.0.241 vs.0.254mg/dl),且MCAO+rt PA+早期RIC组降低的更明显,但各组间未见统计学差异。2、有效性方面:(1)MCAO大鼠再灌注1d、3d、7d后各组的行为学评分显示MCAO+rt PA+早期RIC和MCAO+rt PA+晚期RIC组大鼠的行为学评分均显著低于MCAO+rt PA组,差异具有统计学意义(P<0.05),两个RIC组大鼠的行为学评分在各时间点均无统计学差异(P>0.05)。(2)MCAO大鼠再灌注72h后,MCAO+rt PA+早期RIC和MCAO+rt PA+晚期RIC组大鼠的梗死面积均显著小于MCAO+rt PA组,具有统计学差异(P<0.05),早期RIC与晚期RIC两组间并无统计学差异(P>0.05)。(3)MCAO大鼠再灌注后24h和7d后,与MCAO+rt PA组相比,脑组织HE染色可见MCAO+rt PA+早期RIC和MCAO+rt PA+晚期RIC组大鼠脑组织损伤程度较轻,神经元存活比例较高。(4)MCAO大鼠再灌注24h和7d后,MCAO+rt PA+早期RIC和MCAO+rt PA+晚期RIC组大鼠脑组织的caspase-1和IL-1β表达均较MCAO+rt PA组显著降低。两个RIC组相比,caspase-1和IL-1β表达在再灌注24h和7d均无统计学差异。结论:1、RIC治疗对接受rt PA静脉溶栓的MCAO大鼠是安全的,不会增加血脑屏障破坏与出血转化风险。2、RIC治疗对接受rt PA静脉溶栓的MCAO大鼠是有效的,可有效减少脑梗死体积、减少神经元损伤,并改善神经功能缺损症状。3、RIC改善静脉溶栓MCAO大鼠预后的机制可能与其下调caspase-1/IL-1β炎性通路有关。
关键词:急性脑缺血性卒中;远隔缺血中处理;重组组织型纤溶酶原激活物;caspase-1;IL-1β;