P13K-Akt通路对老年心肌缺血预适应模型大鼠线粒体通透性转换孔开放程度的影响
韦艳红1,刘晓冬2,刘 艳1,陆丽娟1
(1.齐齐哈尔医学院附属第三医院全科病房,黑龙江 齐齐哈尔 161000;
2.吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室,吉林 长春 130021)
[摘 要] 目的:探讨P13K-Akt通路对老年心肌缺血预适应 (IPC)模型大鼠线粒体通透性转换孔 (mPTP)开放程度的影响,阐 明 其 可 能 机 制。方 法:21-23月 龄Wistar大 鼠35只 随 机 分 为 缺 血 再 灌 注 (I/R)组、I/R+P13K抑制剂 Wortmannin (Wort)组、IPC组、IPC+Wort组和假手术组,每 组7只。分 别 建 立I/R、IPC模型,Wort组大鼠再灌 注 前 尾 静 脉 注 射 Wort0.6 mg·kg-1。120 min 再 灌 注 结 束 后,提取心肌组织蛋白,Westernblotting法检测大鼠心肌组织中Akt及p-Akt蛋白相对表达水平。差速离心法分离大鼠心肌线粒体,酶标仪检测线粒体内超氧化物水平、超氧化物歧化酶 (SOD)活 性 及 心 肌mPTP开 放 程 度。结 果:与I/R 组(0.288±0.071)比较,IPC组大鼠心肌 组 织p-Akt蛋白 相 对 表 达 水 平 (0.346±0.051)明显 升 高 (P<0.05),I/R+Wort组大鼠心肌组织中p-Akt蛋白相对表达水平 (0.044±0.010)明 显 降 低 (P<0.01)。与 I/R 组(0.216±0.024) 比 较,IPC组大鼠粒线粒体超氧化物水平 (0.187±0.022) 明 显 降 低 (P <0.05),I/R+Wort组大鼠粒线粒体超氧化物水平 (0.218±0.029)无明 显 变 化 (P>0.05)。与I/R组 (1.15±0.15)比较,IPC组大鼠线粒体SOD活性 (1.39±0.14)明显 升 高 (P<0.05),I/R+Wort组大 鼠 线 粒 体SOD活性(1.17±0.21)无明显变化 (P>0.05)。在6~20min时,与I/R组比较,IPC组大鼠心肌mPTP开放程度明显降低 (P<0.05),I/R+ Wort 组 大 鼠 心 肌mPTP开 放程度无明显变化 (P >0.05); 与 IPC组 比 较,IPC+Wort组大鼠心肌mPTP开放程度明 显 增 加 (P<0.05)。结论:老 年 大 鼠IPC可通 过 激 活P13K-Akt通路抑制心肌mPTP的开放。
[关键词] 缺血再灌注;缺血预适应;磷脂酰肌醇3激酶;蛋白激酶 B;线粒体通透性转换孔