缺血预适应对青年与老年大鼠缺血 /再灌注心肌氧化应激及线粒体功能的影响*
柴囡楠1,2, 张 昊1, 王俊莹1, 李玲旭1, 赵雅君1
( 1哈尔滨医科大学病理生理教研室,黑龙江 哈尔滨 150086; 2赤峰学院医学院,内蒙古 赤峰 024000)
[摘 要] 目的: 探讨缺血预适应( ischemic preconditioning,IPC) 对青年与老年大鼠缺血/再灌注( ischemia /reperfusion,IR) 心肌损伤的影响。方法: 雄性 3 月龄( 青年) 与 20 月龄( 老年) Wistar 大鼠,应用离体心脏灌流方法复制心肌 IR 与 IPC 模型。实验分为青年缺血/再灌注( YIR) 组、青年缺血预适应( YPC) 组、老年缺血再灌注( OIR)组与老年缺血预适应( OPC) 组。透射电镜观察心肌及心肌线粒体超微结构变化; TTC 染色测定心肌梗死面积; 比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶( LDH) 活性、心肌组织中超氧化物歧化酶( SOD) 活性及丙二醛( MDA) 含量; 酶联免疫吸附法测定心肌组织硝基化与羰基化蛋白质含量,TUNEL 方法检测心肌细胞凋亡; 氧电极法测定线粒体呼吸功能及钙诱导的线粒体渗透性转运孔开放情况。结果: 与 YIR 组比较,YPC 组心肌梗死面积明显减少,冠脉流出液中 LDH 活性降低,心肌组织的 SOD 活性增加,MDA 含量降低,心肌硝基化与羰基化蛋白含量降低。电镜下可见YPC 组心肌及分离的心肌线粒体膜结构完整、基质致密。YIR 组心肌线粒体呼吸控制率与Ⅲ态耗氧量及 P/O 比值均明显增加,质子漏出减少,钙诱导的线粒体肿胀明显减轻,心肌细胞凋亡率下降。而与 OIR 组比较,OPC 组上述指标均无显著统计学差异。与 YPC 组比较,OPC 组心肌超微结构损伤明显增加,心肌氧化应激水平增加,线粒体呼吸功能下降,心肌细胞凋亡与坏死增多。结论: 缺血预适应能够保护青年大鼠心肌缺血/再灌注损伤; 而老年大鼠心脏对预适应刺激减敏,导致缺血预适应心肌保护作用钝化,这可能与老龄 IPC 心脏氧化应激水平增加导致线粒体损伤、细胞凋亡有关。
[关键词] 缺血/再灌注; 缺血预适应; 氧化应激; 线粒体功能; 心肌